H9C2(2-1)大(Da)鼠(Shu)心(Xin)肌(Ji)细(Xi)胞(Bao)系(Xi)
英(Ying)文(Wen)名(Ming)称(Cheng) | H9C2(2-1) | 规(Gui)格(Ge) | 1×(?)106cells |
种(Zhong)属(Shu) | 大(Da)鼠(Shu) | 生(Sheng)长(Chang)特(Te)性(Xing) | 贴(Tie)壁(Bi)细(Xi)胞(Bao) |
细(Xi)胞(Bao)形(Xing)态(Tai) | 成(Cheng)肌(Ji)细(Xi)胞(Bao)样(Yang) | 货(Huo)号(Hao) | E-XB6572 |
用(Yong)途(Tu) | 仅(Jin)供(Gong)科(Ke)研(Yan)研(Yan)究(Jiu)实(Shi)验(Yan) | 货(Huo)期(Qi) | 现(Xian)货(Huo) |
别(Bie)称(Cheng) H9c2 (2-1); H9c2; H9C2
种(Zhong)属(Shu) 大(Da)鼠(Shu)
年(Nian)龄(Ling)（(?)性(Xing)别(Bie)）(?) 胚(Pei)胎(Tai)
组(Zu)织(Zhi)来(Lai)源(Yuan) 心(Xin)脏(Zang)，(?)心(Xin)肌(Ji)层(Ceng)
生(Sheng)长(Chang)特(Te)性(Xing) 贴(Tie)壁(Bi)细(Xi)胞(Bao)
细(Xi)胞(Bao)形(Xing)态(Tai) 成(Cheng)肌(Ji)细(Xi)胞(Bao)样(Yang)
背(Bei)景(Jing)描(Miao)述(Shu) H9c2(2-1)细(Xi)胞(Bao)是(Shi)一(Yi)株(Zhu)由(You)Kimes·(?)B和(He)Brandt·(?)B从(Cong)BD1X大(Da)鼠(Shu)胚(Pei)胎(Tai)心(Xin)脏(Zang)组(Zu)织(Zhi)的(De)克(Ke)隆(Long)细(Xi)胞(Bao)株(Zhu)亚(Ya)克(Ke)隆(Long)得(De)到(Dao)的(De)细(Xi)胞(Bao)株(Zhu)；(?)H9c2(2-1)细(Xi)胞(Bao)表(Biao)现(Xian)出(Chu)许(Xu)多(Duo)骨(Gu)骼(Ge)肌(Ji)的(De)特(Te)性(Xing)。(?)H9c2(2-1)细(Xi)胞(Bao)中(Zhong)的(De)成(Cheng)肌(Ji)细(Xi)胞(Bao)能(Neng)融(Rong)合(He)形(Xing)成(Cheng)多(Duo)核(He)的(De)肌(Ji)管(Guan)，(?)并(Bing)对(Dui)乙(Yi)酰(Xian)胆(Dan)的(De)刺(Ci)激(Ji)发(Fa)生(Sheng)反(Fan)应(Ying)。(?)如(Ru)果(Guo)培(Pei)养(Yang)基(Ji)中(Zhong)的(De)血(Xue)清(Qing)浓(Nong)度(Du)下(Xia)降(Jiang)到(Dao)1%，(?)H9c2(2-1)细(Xi)胞(Bao)融(Rong)合(He)发(Fa)生(Sheng)得(De)很(Hen)快(Kuai)。(?) 生(Sheng)物(Wu)安(An)全(Quan)等(Deng)级(Ji) 1 生(Sheng)长(Chang)培(Pei)养(Yang)基(Ji) DMEM＋(?)10% FBS＋(?)1% P/S 推(Tui)荐(Jian)传(Chuan)代(Dai)比(Bi)例(Li) 1:2-1:4 推(Tui)荐(Jian)换(Huan)液(Ye)频(Pin)率(Lu) 2~3次(Ci)/周(Zhou) 冻(Dong)存(Cun)条(Tiao)件(Jian) 冻(Dong)存(Cun)液(Ye)：(?)55% 基(Ji)础(Chu)培(Pei)养(Yang)基(Ji)+40%FBS+5%DMSO 温(Wen)度(Du)：(?)液(Ye)氮(Dan) 培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian) 气(Qi)相(Xiang)：(?)空(Kong)气(Qi)，(?)95%；(?)CO2，(?)5% 温(Wen)度(Du)：(?)37℃(?) 受(Shou)体(Ti)表(Biao)达(Da)情(Qing)况(Kuang) acetylcholine, expressed 基(Ji)因(Yin)表(Biao)达(Da)情(Qing)况(Kuang) myokinase; creatine phosphokinase; myosin 保(Bao)藏(Cang)机(Ji)构(Gou) ATCC; CRL-1446 BCRC; 60096 BCRJ; 0098 ECACC; 88092904 |
1. 收(Shou)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)后(Hou)首(Shou)先(Xian)观(Guan)察(Cha)细(Xi)胞(Bao)瓶(Ping)是(Shi)否(Fou)完(Wan)好(Hao)，(?)培(Pei)养(Yang)液(Ye)是(Shi)否(Fou)有(You)漏(Lou)液(Ye)、(?)浑(Hun)浊(Zhuo)等(Deng)现(Xian)象(Xiang)，(?)干(Gan)冰(Bing)运(Yun)输(Shu)的(De)细(Xi)胞(Bao)检(Jian)查(Cha)干(Gan)冰(Bing)是(Shi)否(Fou)*挥(Hui)发(Fa)，(?)细(Xi)胞(Bao)是(Shi)否(Fou)解(Jie)冻(Dong)，(?)若(Ruo)有(You)上(Shang)述(Shu)现(Xian)象(Xiang)发(Fa)生(Sheng)请(Qing)及(Ji)时(Shi)和(He)我(Wo)们(Men)联(Lian)系(Xi)。(?)
2. 仔(Zi)细(Xi)阅(Yue)读(Du)细(Xi)胞(Bao)说(Shuo)明(Ming)书(Shu)，(?)了(Liao)解(Jie)细(Xi)胞(Bao)相(Xiang)关(Guan)信(Xin)息(Xi)，(?)如(Ru)细(Xi)胞(Bao)形(Xing)态(Tai)、(?)所(Suo)用(Yong)培(Pei)养(Yang)基(Ji)、(?)血(Xue)清(Qing)比(Bi)例(Li)、(?)所(Suo)需(Xu)细(Xi)胞(Bao)因(Yin)子(Zi)等(Deng)，(?)确(Que)保(Bao)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian)一(Yi)致(Zhi)，(?)若(Ruo)由(You)于(Yu)培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian)不(Bu)一(Yi)致(Zhi)而(?)导(Dao)致(Zhi)细(Xi)胞(Bao)出(Chu)现(Xian)问(Wen)题(Ti)，(?)责(Ze)任(Ren)由(You)客(Ke)户(Hu)自(Zi)行(Xing)承(Cheng)担(Dan)。(?)
3. 用(Yong)75%酒(Jiu)精(Jing)擦(Ca)拭(Shi)细(Xi)胞(Bao)瓶(Ping)表(Biao)面(Mian)，(?)显(Xian)微(Wei)镜(Jing)下(Xia)观(Guan)察(Cha)细(Xi)胞(Bao)状(Zhuang)态(Tai)。(?)因(Yin)运(Yun)输(Shu)问(Wen)题(Ti)，(?)部(Bu)分(Fen)细(Xi)胞(Bao)由(You)于(Yu)温(Wen)度(Du)变(Bian)化(Hua)及(Ji)剧(Ju)烈(Lie)碰(Peng)亡(Wang)破(Po)碎(Sui)形(Xing)成(Cheng)碎(Sui)片(Pian)，(?)是(Shi)正(Zheng)常(Chang)现(Xian)象(Xiang)。(?).观(Guan)察(Cha)好(Hao)细(Xi)胞(Bao)状(Zhuang)态(Tai)后(Hou)，(?)75%酒(Jiu)精(Jing)消(Xiao)毒(Du)瓶(Ping)壁(Bi)将(Jiang)T25瓶(Ping)置(Zhi)于(Yu)37℃(?)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)放(Fang)置(Zhi)2-4h。(?)
4. 贴(Tie)壁(Bi)细(Xi)胞(Bao)可(Ke)以(Yi)消(Xiao)化(Hua)，(?)悬(Xuan)浮(Fu)细(Xi)胞(Bao)直(Zhi)接(Jie)混(Hun)匀(Yun)收(Shou)集(Ji)细(Xi)胞(Bao)，(?)900 rpm-1000 rpm离(Li)心(Xin)3 min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)。(?)加(Jia)5 mL PBS重(Zhong)悬(Xuan)细(Xi)胞(Bao)，(?)再(Zai)900 rpm-1000 rpm离(Li)心(Xin)3 min，(?)，(?)用(Yong)新(Xin)鲜(Xian)的(De)*培(Pei)养(Yang)基(Ji)重(Zhong)悬(Xuan)细(Xi)胞(Bao)，(?)并(Bing)接(Jie)种(Zhong)到(Dao)新(Xin)的(De)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)或(Huo)培(Pei)养(Yang)皿(Min)中(Zhong)，(?)置(Zhi)于(Yu)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)进(Jin)行(Xing)培(Pei)养(Yang)。(?)
5. 请(Qing)客(Ke)户(Hu)用(Yong)相(Xiang)同(Tong)条(Tiao)件(Jian)的(De)培(Pei)养(Yang)基(Ji)用(Yong)于(Yu)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)。(?)
6. 建(Jian)议(Yi)客(Ke)户(Hu)收(Shou)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)后(Hou)前(Qian)3天(Tian)各(Ge)拍(Pai)几(Ji)张(Zhang)细(Xi)胞(Bao)照(Zhao)片(Pian)，(?)记(Ji)录(Lu)细(Xi)胞(Bao)状(Zhuang)态(Tai)，(?)便(Bian)于(Yu)和(He)我(Wo)司(Si)技(Ji)术(Shu)部(Bu)沟(Gou)通(Tong)交(Jiao)流(Liu)。(?)由(You)于(Yu)运(Yun)输(Shu)的(De)原(Yuan)因(Yin)，(?)个(Ge)别(Bie)敏(Min)感(Gan)细(Xi)胞(Bao)会(Hui)出(Chu)现(Xian)不(Bu)稳(Wen)定(Ding)的(De)情(Qing)况(Kuang)，(?)请(Qing)及(Ji)时(Shi)和(He)我(Wo)们(Men)联(Lian)系(Xi)，(?)告(Gao)知(Zhi)细(Xi)胞(Bao)的(De)具(Ju)体(Ti)情(Qing)况(Kuang)，(?)以(Yi)便(Bian)我(Wo)们(Men)的(De)技(Ji)术(Shu)人(Ren)员(Yuan)跟(Gen)踪(Zong)回(Hui)访(Fang)直(Zhi)至(Zhi)问(Wen)题(Ti)解(Jie)决(Jue)。(?)
7. 该(Gai)细(Xi)胞(Bao)仅(Jin)供(Gong)科(Ke)研(Yan)使(Shi)用(Yong)。(?)
8. 备(Bei)注(Zhu)：(?)运(Yun)输(Shu)用(Yong)的(De)培(Pei)养(Yang)基(Ji)(灌(Guan)液(Ye)培(Pei)养(Yang)基(Ji))不(Bu)能(Neng)再(Zai)用(Yong)来(Lai)培(Pei)养(Yang)细(Xi)胞(Bao)，(?)请(Qing)换(Huan)用(Yong)按(An)照(Zhao)说(Shuo)明(Ming)书(Shu)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian)新(Xin)配(Pei)制(Zhi)的(De)*培(Pei)养(Yang)基(Ji)来(Lai)培(Pei)养(Yang)细(Xi)胞(Bao)。(?) 收(Shou)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)后(Hou)次(Ci)传(Chuan)代(Dai)建(Jian)议(Yi)1：(?)2传(Chuan)代(Dai) 。(?)
9. 注(Zhu)意(Yi)：(?) 1:2传(Chuan)代(Dai)就(Jiu)是(Shi)1个(Ge)T25瓶(Ping)传(Chuan)2个(Ge)T25瓶(Ping)或(Huo)者(Zhe)2个(Ge)6cm皿(Min)。(?)不(Bu)是(Shi)1个(Ge)T25瓶(Ping)传(Chuan)2个(Ge)10cm皿(Min)。(?)
1)复(Fu)苏(Su)细(Xi)胞(Bao)：(?)将(Jiang)含(Han)有(You)1 mL细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)的(De)冻(Dong)存(Cun)管(Guan)在(Zai) 37℃(?)水(Shui)浴(Yu)中(Zhong)迅(Xun)速(Su)摇(Yao)晃(Huang)解(Jie)冻(Dong)，(?)加(Jia)4 mL培(Pei)养(Yang)基(Ji)混(Hun)合(He)均(Jun)匀(Yun)。(?)在(Zai)1000 rpm条(Tiao)件(Jian)下(Xia)离(Li)心(Xin)3 min，(?)弃(Qi)去(Qu)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)加(Jia)1-2 mL培(Pei)养(Yang)基(Ji)后(Hou)吹(Chui)匀(Yun)。(?)然(Ran)后(Hou)将(Jiang)所(Suo)有(You)细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)加(Jia)入(Ru)含(Han)适(Shi)量(Liang)培(Pei)养(Yang)基(Ji)的(De)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)中(Zhong)培(Pei)养(Yang)过(Guo)夜(Ye)(或(Huo)将(Jiang)细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)加(Jia)入(Ru)10 cm皿(Min)中(Zhong)，(?)加(Jia)入(Ru)约(Yue)8 mL培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)培(Pei)养(Yang)过(Guo)夜(Ye))。(?)第(Di)二(?)天(Tian)换(Huan)液(Ye)并(Bing)检(Jian)查(Cha)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)。(?)
2)细(Xi)胞(Bao)传(Chuan)代(Dai)：(?)如(Ru)果(Guo)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)达(Da)80%-90%，(?)即(Ji)可(Ke)进(Jin)行(Xing)传(Chuan)代(Dai)培(Pei)养(Yang)。(?)
a、(?)弃(Qi)去(Qu)培(Pei)养(Yang)上(Shang)清(Qing)，(?)用(Yong)不(Bu)含(Han)钙(Gai)、(?)镁(Mei)离(Li)子(Zi)的(De)PBS润(Run)洗(Xi)细(Xi)胞(Bao)1-2次(Ci)。(?)
b、(?)加(Jia)1 mL消(Xiao)化(Hua)液(Ye)(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于(Yu)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)中(Zhong)，(?)使(Shi)消(Xiao)化(Hua)液(Ye)浸(Jin)润(Run)所(Suo)有(You)细(Xi)胞(Bao)，(?)将(Jiang)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)置(Zhi)于(Yu)37℃(?)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)消(Xiao)化(Hua)1-2 min(视(Shi)细(Xi)胞(Bao)情(Qing)况(Kuang)而(?)定(Ding))，(?)然(Ran)后(Hou)在(Zai)显(Xian)微(Wei)镜(Jing)下(Xia)观(Guan)察(Cha)细(Xi)胞(Bao)消(Xiao)化(Hua)情(Qing)况(Kuang)，(?)若(Ruo)细(Xi)胞(Bao)大(Da)部(Bu)分(Fen)变(Bian)圆(Yuan)并(Bing)脱(Tuo)落(Luo)，(?)迅(Xun)速(Su)拿(Na)回(Hui)操(Cao)作(Zuo)台(Tai)，(?)轻(Qing)敲(Qiao)几(Ji)下(Xia)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)后(Hou)加(Jia)2-3ml*培(Pei)养(Yang)基(Ji)终(Zhong)止(Zhi)消(Xiao)化(Hua)。(?)轻(Qing)轻(Qing)打(Da)匀(Yun)后(Hou)装(Zhuang)入(Ru)无(Wu)菌(Jun)离(Li)心(Xin)管(Guan)中(Zhong)，(?)1000 rpm离(Li)心(Xin)5 min，(?)弃(Qi)去(Qu)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)补(Bu)加(Jia)1-2 mL培(Pei)养(Yang)液(Ye)后(Hou)吹(Chui)匀(Yun)。(?)
c、(?)将(Jiang)细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)按(An)1:2比(Bi)例(Li)分(Fen)到(Dao)新(Xin)的(De)含(Han)8 mL培(Pei)养(Yang)基(Ji)的(De)新(Xin)皿(Min)中(Zhong)或(Huo)者(Zhe)瓶(Ping)中(Zhong)，(?)置(Zhi)于(Yu)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)培(Pei)养(Yang)。(?)
3)细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)：(?)待(Dai)细(Xi)胞(Bao)生(Sheng)长(Chang)状(Zhuang)态(Tai)良(Liang)好(Hao)时(Shi)，(?)可(Ke)进(Jin)行(Xing)细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)。(?)下(Xia)面(Mian) T25 瓶(Ping)为(Wei)例(Li);
a、(?)收(Shou)集(Ji)细(Xi)胞(Bao)及(Ji)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)液(Ye)，(?)装(Zhuang)入(Ru)无(Wu)菌(Jun)离(Li)心(Xin)管(Guan)中(Zhong)，(?)1000 rpm条(Tiao)件(Jian)下(Xia)离(Li)心(Xin)4 min，(?)弃(Qi)去(Qu)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)用(Yong)PBS清(Qing)洗(Xi)一(Yi)遍(Bian)，(?)弃(Qi)尽(Jin)PBS，(?)进(Jin)行(Xing)细(Xi)胞(Bao)计(Ji)数(Shu)。(?)
b、(?)根(Gen)据(Ju)细(Xi)胞(Bao)数(Shu)量(Liang)加(Jia)入(Ru)无(Wu)血(Xue)清(Qing)细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)液(Ye)，(?)使(Shi)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)5×(?)106~1×(?)107/mL，(?)轻(Qing)轻(Qing)混(Hun)匀(Yun)，(?)每(Mei)支(Zhi)冻(Dong)存(Cun)管(Guan)冻(Dong)存(Cun)1mL细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)，(?)注(Zhu)意(Yi)冻(Dong)存(Cun)管(Guan)做(Zuo)好(Hao)标(Biao)识(Shi)。(?)
c、(?)将(Jiang)冻(Dong)存(Cun)管(Guan)放(Fang)入(Ru)-80℃(?)冰(Bing)箱(Xiang)，(?)24 h后(Hou)转(Zhuan)入(Ru)液(Ye)氮(Dan)灌(Guan)储(Chu)存(Cun)。(?)记(Ji)录(Lu)冻(Dong)存(Cun)管(Guan)位(Wei)置(Zhi)以(Yi)便(Bian)下(Xia)次(Ci)拿(Na)取(Qu)。(?)
大(Da)鼠(Shu)大(Da)隐(Yin)静(Jing)脉(Mai)平(Ping)滑(Hua)肌(Ji)细(Xi)胞(Bao) | GM15850细(Xi)胞(Bao) |
GRANTA-519细(Xi)胞(Bao) | HCC-1359细(Xi)胞(Bao) |
HCC1187细(Xi)胞(Bao) | HCC-95细(Xi)胞(Bao) |
HCC-1195细(Xi)胞(Bao) | Hs362T细(Xi)胞(Bao) |
GR-M细(Xi)胞(Bao) | HT55细(Xi)胞(Bao) |
GSS细(Xi)胞(Bao) | Jiyoye细(Xi)胞(Bao) |
GSU细(Xi)胞(Bao) | KNS-42细(Xi)胞(Bao) |
H4细(Xi)胞(Bao) | L1210细(Xi)胞(Bao) |
H4-II-E-C3细(Xi)胞(Bao) | Lu-134-A(LU-134-A-H)细(Xi)胞(Bao) |
H69AR细(Xi)胞(Bao) | MAVER-1细(Xi)胞(Bao) |
HARA细(Xi)胞(Bao) | MMT060562细(Xi)胞(Bao) |
HARA-B细(Xi)胞(Bao) | NCI-H1341细(Xi)胞(Bao) |
HCC1008细(Xi)胞(Bao) | H9C2(2-1)大(Da)鼠(Shu)心(Xin)肌(Ji)细(Xi)胞(Bao)系(Xi)NCI-H1792细(Xi)胞(Bao) |
HCC1143细(Xi)胞(Bao) | NCI-H209细(Xi)胞(Bao) |
HCC-1171细(Xi)胞(Bao) | NCI-H460细(Xi)胞(Bao) |
级(Ji)会(Hui)员(Yuan)_a.png)